从藏药细果角茴香中提取分离四种生物碱的方法

本发明提供了从藏药细果角茴香中提取分离四种生物碱的方法。本发明中，用高速逆流色谱法从细果角茴香中提取分离四种生物碱类化合物，相对传统的柱色谱法操作简单，分离时间明显缩短，得到的化合物纯度也相对较高。

1.从藏药细果角茴香中提取分离四种生物碱的方法，其特征在于：它包括如下操作步骤：(1)粗提物的制备：取细果角茴香，用70％-95％v/v乙醇为溶剂提取，提取液浓缩除去乙醇后，所得浸膏加盐酸，除去不溶物，溶液脱脂后，加碱调节pH至9～10，再用氯仿萃取，收集氯仿层，除去溶剂后，干燥得到生物碱粗提物；(2)采用高速逆流色谱法分离：取氯仿-甲醇-0.1M HCl＝4∶3∶2，置于分液漏斗中配制两相溶剂系统，取下相为固定相，上相位流动相；将固定相充满逆流色谱的色谱柱，在25-28℃下，主机正转，转速为800-900r/min，然后以1.5-1.8mL/min的流速泵入流动相，至两相溶剂在柱中达到平衡状态；步骤(1)制备的粗提物，以流动相为溶剂溶解，制备样品溶液；将样品溶液进样，在紫外检测器下分别接收各目标成分，即可分别得到leptopidine，oxohydrastinine，(-)-N-methylanadine，N-Feruloyltyramine。
2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：步骤(1)中，乙醇浓度为95％v/v，提取温度为50-70℃，优选为60℃。
3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：步骤(1)中，盐酸的加入量为浸膏体积的4倍，盐酸体积分数为2％。
4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：步骤(1)中，脱脂处理是采用石油醚或氯仿萃取实现；优选使用石油醚。
5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：步骤(1)中，所述碱为氨水。
6.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：步骤(2)中，紫外检测波长为280nm。
7.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：步骤(2)中，粗提物用量为200mg。
8.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：步骤(2)中，将样品溶液进样，在紫外检测器下分别接收出峰时间100-300min内的各目标成分，即可分别得到leptopidine，oxohydrastinine，(-)-N-methylanadine，N-Feruloyltyramine。
9.根据权利要求1或8所述的方法，其特征在于：步骤(2)中，将样品溶液进样，在紫外检测器下分别接收出峰时间120-270min内的各目标成分，即可分别得到leptopidine，oxohydrastinine，(-)-N-methylanadine，N-Feruloyltyramine。
10.根据权利要求9所述的方法，其特征在于：步骤(2)中，接收出峰时间为120-125min的目标成分，即可得到leptopidine；接收出峰时间为142-157min的目标成分，即可得到oxohydrastinine；接收出峰时间为207-226min的目标成分，即可得到(-)-N-methylanadine；接收出峰时间为258-270min的目标成分，即可得到N-Feruloyltyramine。