高速逆流色谱从红花籽粕中制备5-羟色胺衍生物方法

本发明涉及天然药物的分离制备方法，具体涉及高速逆流色谱法从红花籽粕中分离制备2个5-羟色胺衍生物的方法。高速逆流色谱的固定相和流动相由氯仿、甲醇和0.1mol/LHCL水混合后分层，下相作为固定相，上相作为流动相。本发明不需要使用固相载体，无不可逆吸附，操作方便，条件固定，易于重复，样品无损失、无污染、高效、快速、低成本分离制备5-羟色胺衍生物，获得的

1.一种高速逆流色谱从红花籽粕中制备5-羟色胺衍生物方法，其特征在于所述的方法包括以下步骤：①将氯仿、甲醇和0.1 mol/L HCL水溶液混合成混合溶剂，分层；②将5-羟色胺衍生物粗提物溶于①步骤的下层中；③ 取①步骤混合溶剂分层，下相作为固定相，上相作为流动相，将固定相和流动相先后泵入高速逆流色谱内，将②步骤溶液经进样阀进入色谱柱，进样完毕后继续泵入流动相；④依据检测器谱图分别收集分离物，浓缩，即得N-(p-香豆酰)5-羟色胺和阿魏酰5-羟色胺单体。
2.如权利要求1所述的高速逆流色谱从红花籽粕中制备5-羟色胺衍生物方法，其特征在于：所述的步骤①中的氯仿、甲醇和0.1 mol/L HCL水溶液的体积比为3～5 ∶ 4 ∶ 3～5。
3.如权利要求1 所述的高速逆流色谱从红花籽粕中制备5-羟色胺衍生物方法，其特征在于：所述的步骤②中5-羟色胺衍生物粗提物溶于混合溶剂后的浓度为10～30 mg/mL。
4.如权利要求1或3 所述的高速逆流色谱从红花籽粕中制备5-羟色胺衍生物方法，其特征在于所述的5-羟色胺衍生物粗提物由下列方法制备：将红花籽粕按液料比5～20:1回流提取0.5～2 h，提取1～3次合并提取液，浓缩至干，用60～90%甲醇溶解，等体积正己烷萃取，取甲醇相蒸干，用乙酸乙酯溶解，然后等体积水萃取，取乙酸乙酯相蒸干备用。
5.如权利要求1 所述的高速逆流色谱从红花籽粕中制备5-羟色胺衍生物方法，其特征在于：所述的高速逆流色谱仪流速范围为1～3 mL/min，转速范围为600～900 r/min。
6.如权利要求1所述的高速逆流色谱从红花籽粕中制备5-羟色胺衍生物方法，其特征在于：所述的检测波长为210～360nm。