一种利用赤红球菌制备2,6-二氟苯甲酰胺的方法

本发明涉及一种利用赤红球菌制备2,6-二氟苯甲酰胺的方法，步骤为：（1）种子与发酵培养；（2）赤红球菌悬浮液的制备；（3）2,6-二氟苯甲腈的转化；（4）制备产物成品。本发明提供了一种利用赤红球菌水解2,6-二氟苯甲腈生成2,6-二氟苯甲酰胺的方法，本发明中微生物转化方法具有很高的催化效率，提高了底物转化率，在3.5mol/L的投料浓度下，2,6-二氟苯甲腈的转化率高达100%，2,6-二氟苯甲酰胺的选择性为100%，无副产物2,6-二氟苯甲酸的产生。简化了目标产物的分离纯化工艺，反应条件温和，对设备要求不高，易于生产。

1.一种利用赤红球菌制备2,6-二氟苯甲酰胺的方法，其特征在于：方法如
下
⑴转化：在pH6-9的KH₂PO₄-NaOH缓冲液体系中，投入底物2,6-二氟苯甲
腈，赤红球菌(Rhodococcusruber)CGMCC3090细胞浓度0.66-3.30g/L，转化
条件为转速110-220r/min，转化温度为20-40℃，转化时间3-28h；
⑵制备产物成品：将转化结束后的料液过滤，得到产物晶体，水洗产物晶体
再经重结晶即可得到产物纯品；步骤⑵过滤得滤液，滤液经过萃取获得产物晶体，
然后重结晶即得2,6-二氟苯甲酰胺纯品；
在步骤⑴还加入终浓度为0.5wt％-10wt％的促溶剂，
所述促溶剂为吐温80，所述2,6-二氟苯甲腈的投入浓度为：0.5-3.5mol/L；
所述萃取处理的萃取溶剂为乙酸乙酯、三氯甲烷、二氯甲烷或乙酸丁酯；
所述重结晶溶剂为甲醇、乙醇、氯仿、丙酮、二氯甲烷、三氯甲烷或正己烷。
2.根据权利要求1所述的利用赤红球菌制备2,6-二氟苯甲酰胺的方法，其
特征在于：所述赤红球菌CGMCC3090的发酵方法为：
⑴种子与发酵培养：取赤红球菌CGMCC3090菌种接种于一级种子培养基
中，140-220r/min、26-32℃、培养24-32h，得到种子培养液，以2％-5％的接
种量转接于新鲜的发酵培养基，培养42-54h，得到菌体发酵液；
⑵赤红球菌悬浮液的制备：将上述发酵液离心，去上清，所得湿菌体细胞用
pH6-9的KH2PO4-NaOH缓冲液洗涤2-3次并悬浮于等体积的缓冲液中，得到赤
红球菌细胞悬浮液。