一种肉眼可辨的水胺硫磷快速比色检测方法

本发明公开了一种NaH

1.一种肉眼可辨的水胺硫磷快速比色检测方法，其特征在于：包括以下步骤：(1) 将随机ssDNA序列与Hemin混匀孵育，制备出待测样液；(2) 将待测样液与含有水胺硫磷的样品混匀孵育，之后加入NaH₂PO₄缓冲液混匀，最后再加入H₂O₂和TMB混合液混匀，通过测定混合溶液在450 nm处的吸光值变化来判定水胺硫磷的含量。
2.根据权利要求1所述的肉眼可辨的水胺硫磷快速比色检测方法，其特征在于：上述步骤(1)中，随机ssDNA序列的使用浓度为20 nM，其碱基组成和序列长度没有特殊要求，Hemin的使用浓度为14 μM。
3.根据权利要求1所述的肉眼可辨的水胺硫磷快速比色检测方法，其特征在于：上述步骤(2)中，H₂O₂的使用浓度为40 mM，TMB的使用浓度为0.1 mM。
4.根据权利要求1所述的肉眼可辨的水胺硫磷快速比色检测方法，其特征在于：具体检测步骤：(1) 制备已知水胺硫磷浓度的检测体系：取11支刻度离心管，分别加入随机ssDNA序列母液和 Hemin母液，充分混匀后置于30℃条件下孵育，之后加入水胺硫磷标准液，使得整个检测体系中的水胺硫磷含量维持在2-100 ppb，充分混匀后继续孵育，再加入NaH₂PO₄缓冲液，最后再加入H₂O₂和TMB混合液至500 μL，充分混匀后留作以下测定用；(2) 另取1支按步骤(1)方法制备的检测溶液，加入2.5 μL三蒸水替代水胺硫磷标准液，处理后作为空白对照体系溶液；(3) 分别取200 μL步骤(1)和步骤(2)制备的标准溶液和空白对照液置于96孔酶标板中，用酶标仪进行扫描测定450 nm处吸收峰；全波长扫描范围为300-800 nm，获得其吸收光谱；(4) 以不同浓度的水胺硫磷与测定的⊿A作图，绘制标准曲线；(5) 制备样品检测体系：取2.5 μL实际样液，按步骤(1)方法制备的检测溶液，充分混匀后按步骤(3)方法测定其吸收峰值；(6) 根据样品在NaH₂PO₄缓冲液体系中测得的吸光度值，查标准曲线，可以求得不同样品中水胺硫磷的含量。
5.根据权利要求1所述的肉眼可辨的水胺硫磷快速比色检测方法，其特征在于：⊿A为待测样品的吸光值-空白样品的吸光值。